本发明提供了一种基于MOF双信号探针的比率型电化学传感器及其制备方法和检测方法,属于电化学传感器技术领域。本发明以Fe-MIL-88NH-2信号探针和Cu-MOF信号探针作为双信号探针,当待测样品中存在马拉硫磷时,基于竞争作用,马拉硫磷与电极基底表面的S-2-Cu-MOF特异性结合,从电极表面脱落,在信号放大物核酸外切酶的循环放大下,Cu～(2+)信号的减弱；由于与马拉硫磷特异性结合的S-2-Cu-MOF脱离S-1-Fe-MIL-88NH-2,S-1-Fe-MIL-88NH-2中的互补链会形成茎环结构,Fe～(3+)信号增强。因此,本发明提供的电化学传感器能够实现Fe～(3+)和Cu～(2+)的双信号定量检测。